带你认识艾滋病的核酸检测

2020-09-26 中国疾控中心艾防中心

在这次新冠肺炎疫情中,核酸检测可谓是功不可没。那么关于艾滋病的核酸检测你是否了解呢?由国家卫生健康委员会发布,2019年7月1日开始实施的《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断》WS-293-2019,将核酸检测纳入艾滋病诊断标准。由中国疾病预防控制中心艾防中心组织专家修订的《全国艾滋病检测技术规范(2020年版)》中也强化了核酸检测的诊断价值。今天我们一起来认识一下艾滋病的核酸检测吧!

核酸检测适用于哪些情况?有什么意义?

核酸检测常用于HIV感染诊断、血液筛查、病程评估及抗病毒治疗效果监测等。

对于筛查试验有反应但抗体试验不确定或阴性的样本,可将核酸检测、临床病史和 CD4+T 淋巴细胞计数检测结果综合判断。对于近期有明确流行病学史的个体,可通过核酸检测判定是否为急性期感染。划重点!核酸检测结果阴性或低于最低检测限不能排除HIV-1感染哦!对于HIV-1感染母亲所生小于18个月龄的婴儿,不同时间的两次HIV-1核酸检测均为阳性即可作出诊断。对于献血者及采供血机构的原料血浆进行核酸检测,可及时发现窗口期感染,减少二代传播。对于经抗病毒药物治疗后的患者,应定期进行HIV-1病毒载量检测,可帮助判断是否继续使用原定的治疗方案以及是否需要更改治疗方案。

核酸检测常用的方法有哪些?

HIV核酸检测主要分为定性和定量试验,均可作为HIV感染诊断试验,不同的方法,检测结果判定和报告也是不同的。

HIV-1核酸定性检测

包括RNA检测和DNA检测。检测方法主要有实时荧光定量 PCR方法、荧光探针PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反应为基础的核酸扩增PCR方法。

检测结果显示“有反应”或“检测到”,报告核酸阳性;检测结果显示“无反应”或“未检测到”,报告核酸阴性。核酸定性检测阴性不能排除HIV-1感染,还需要根据流行病学史、临床表现和实验室其他相关指标进行诊断。

HIV-1核酸定量检测

RNA检测主要是定量检测血浆中的病毒RNA,检测的主要原理是实时荧光定量PCR。DNA检测包括全血、干血斑、PBMC及组织中DNA检测,同定性检测一样,DNA含量测定主要有荧光探针PCR法及以焦磷酸化激活聚合酶(PAP)反应为基础的核酸扩增PCR方法。另外近几年迅速发展起来的一种核酸绝对定量分析技术——数字PCR也可用于HIV核酸定量检测,虽然2020修订版的规范中还没有说明,但相信这种技术在艾滋病领域也会很快发展起来。

对于检测结果:当检测值>5000 CPs/ml(或IUs/ml),报告检测值;检测值≤5000 CPs/ml,再次采样检测后报告检测值,结果>5000 CPs/ml可以作为诊断依据,结果仍≤5000 CPs/ml,则需结合流行病学史、临床病史等结果进行综合判断。检测值小于检测下线,报告低于检测限。划重点!对于暴露前或暴露后预防用药的个体,检测值低于最低检测限不能排除HIV-1感染,需要根据其他相关指标进行综合判断。

核酸检测应该注意什么?

对于专业人员来说,应注意样本采集、送检和保存,HIV核酸检测应在符合要求的实验室中进行,实验人员应充分了解并严格遵守各项规定和掌握操作技能,所用试剂必须是经国家药品监督管理局注册、在有效期内的试剂,并严格按产品说明书操作。同时要做好质量控制,包括从样本接收到发出报告各环节的管理过程,人员、实验室分区和环境、仪器和检测过程等。对于患者或者高危人员来说,可以到疾控中心进行免费的核酸检测,在核酸检测前一天,要注意多休息,补充维生素,避免食用油腻食物和饮酒,放松心情。

核酸检测知识

美国CDC在2019年艾滋病诊断大会上发表了HIV核酸定量检测替代策略的报告,提出了“三步法”替代策略和“两步法”替代策略,研究发现两种策略不仅具有良好的检测准确性,还能有效减少检测成本,及时排除筛查假反应性,缩短检测时间,同时能提高HIV-1核酸定量检测结果在临床工作中的使用价值,但这也需要更多的研究数据来证明。总体来说这种新策略对于今后艾滋病检测工作的完善还是具有指导和借鉴意义的!

参考文献

1.《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》中华人民共和国卫生行业标准 WS-293-2019,中华人民共和国国家卫生健康委员会。

2.《全国艾滋病检测技术规范(2020年版)》,中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心。

3. CDC reports on two alternative HIV testing algorithms [R]. CAP TODAY. AmyCarpenter Aquino, 2019.

(来源:中国疾控中心艾防中心)


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